無外泌體胎牛血清適用外泌體研究,無支原體,無內(nèi)毒素。胎牛血清是大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)重要的生長支持物。天然來源的FBS會含有大量的外泌體等囊泡成分。由于FBS來源的外泌體會對研究結(jié)果產(chǎn)生巨大干擾,因此,外泌體研究時必須使用去除外泌體后的FBS進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
對于大多數(shù)細(xì)胞來說,體外培養(yǎng)時所用的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基都必須在基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上外加FBS作為生長添加物。常用的FBS通常來至牛血清,其中含有大量的牛外泌體。這些外泌體含牛的相關(guān)蛋白質(zhì)或miRNA等分子,當(dāng)研究相關(guān)細(xì)胞自身分泌外泌體時,牛血清中的外泌體可能會造成嚴(yán)重的背景問題,從而影響或干擾結(jié)果的判斷。
無外泌體胎牛血清的主要用途:
無外泌體胎牛血清可用于犬MSC來源外泌體的分離:用10%無外泌體胎牛血清、1%雙抗、1%L-谷氨酰胺和88%DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基,以制得的培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)MSC,取第3-5代收集上清在4℃,300g離心10min除細(xì)胞;收集上清后在4℃,16500g離心20min除去細(xì)胞碎片;收集上清后用0.22um的濾膜過濾;收集上清后在4℃,120000g超高速離心90min;去上清后,用生理鹽水重懸沉淀,再次以4℃,120000g超高速離心90min;去上清后,用生理鹽水重懸沉淀,收集懸液即為犬MSC外泌體制劑。