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胎牛血清(無菌過濾)

更新時(shí)間:2019-10-04瀏覽:1940次

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廣州市超博科技有限公司

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培養(yǎng)基的用途分類

1.營養(yǎng)培養(yǎng)基(加富培養(yǎng)基)  在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì),如血液、血清、酵母浸膏或生長因子等。用以培養(yǎng)對(duì)營養(yǎng)要求高的微生物,如培養(yǎng)百曰咳桿菌需要含有血液的培養(yǎng)基。

2.基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有一般細(xì)菌生長繁殖需要的基本的營養(yǎng)物質(zhì)。zui常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是上面提及的天然培養(yǎng)基中的牛育蛋白胨培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基可作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。

3.鑒別培養(yǎng)基是一類含有某種特定化合物或試劑的培養(yǎng)基。某種微生物在這種培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,它所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與這種特定的化合物或試劑能發(fā)生某種明顯的特征性反應(yīng),根據(jù)這一特征性反應(yīng)可以將某種微生物與其他中微生物區(qū)別開來。主要用于不同類型微生物的快速鑒定,如用來檢查細(xì)菌能否產(chǎn)生硫化氫的醋酸鉛培養(yǎng)基。

4.選擇培養(yǎng)基利用微生物對(duì)某種或某些化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同,在培養(yǎng)基中加入這類物質(zhì),抑制不需要的微生物生長,而利用所需分離的微生物生長,從而達(dá)到分離或鑒別某種微生物的目的,如分離真菌的馬丁氏培養(yǎng)基。既有選擇作用又有鑒別作用的培養(yǎng)基,如鑒別腸道桿菌的遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基。 微生物的生長繁殖除需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)以外,還要求適當(dāng)?shù)腜H范圍。不同微生物對(duì)PH的要求不一樣,霉菌和酵母菌的培養(yǎng)基的PH是偏酸性的,而細(xì)菌或放線菌的培養(yǎng)基的PH為中性或微堿性的。所以配制培養(yǎng)基時(shí),都要根據(jù)不同微生物對(duì)象用稀酸或稀堿將培養(yǎng)基的PH調(diào)到合適的范圍。但配制PH低的瓊脂培養(yǎng)基時(shí),如預(yù)先調(diào)好PH并在高壓蒸汽下滅菌,則瓊脂因水解不能凝固,因此,應(yīng)將培養(yǎng)基的成分和瓊脂分開滅菌后再混合,或在中性PH條件下滅菌后,再調(diào)整PH。

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胎牛血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):

(1需要長期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20'C - 70'C低溫水箱中,4C冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月,由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%因此血清在東入低溫水箱前,必須預(yù)留-定體積空間 否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

(2熱滅活是指56'C, 30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理 因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多而且還會(huì)景響血清的質(zhì)里,補(bǔ)體參與反應(yīng)有細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。

(3瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法-20C至-70C低溫水箱中的血清放入4C冰箱中溶解伏,然后移入室溫待全部溶解后再分裝,在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均-減少沉淀的發(fā)生,切勿直接將血清從-20C進(jìn)入37C解凍這樣因溫度改變太大容易造成蛋白貢疑集而出現(xiàn)沉淀。

(4)-般廠商提供的血清為無菌無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有縣浮物則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾切勿直接過濾血清。

(5)血清中的沉淀物絮狀物主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)里,可用離心3000rpm, 5分鐘去除也可不用處理,顯微鏡 下"小黑點(diǎn)"經(jīng)過熱處理過的血清沉淀物的形成會(huì)顯著增多,有些沉淀物在顯微鏡下觀察象小黑點(diǎn)常誤認(rèn)為血清受污染,一般情況 下此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長但如果懷疑血清質(zhì)里則應(yīng)立即停止使用更換另-批號(hào)的血清。

(6)切勿將血清在37C放蓋久,否則血清會(huì)變得渾濁同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而景響血清質(zhì)里。

胎牛血清OPRS)的作用:

1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金寓和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

5、起酸堿度緩沖液作用。

6、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zi少:牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用里ui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。

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