sigma試劑血清中缺少抗A、B血型抗原的抗體，常用于使免疫反應降到。已經(jīng)證實，人AB血清可以提高多數(shù)人來源細胞生長速率，并且使用濃度比混合型血清更低。更適用于細胞、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏、單抗研制。

1、sigma試劑血清來源 ：可從世界各地收集胎牛血清，但必須符合其質量標準和美國農(nóng)業(yè)部進口要求；

2、血清的收集：必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標準，低溫采集，一次分離，分離后立即混合凍存；

3、血清的制備：超低IgG胎牛血清、透析血清、γ-射線輻照；

4、除菌過濾：0.22μm和0.1μm濾膜過濾；

5、成品分裝：根據(jù)需要分裝成不同規(guī)格。

牛血清的使用所產(chǎn)生的常見問題

（一）由于血清營養(yǎng)豐富，貯存條件特殊，因此在貯存和使用過程中容易產(chǎn)生以下問題：

1、改變培養(yǎng)液的pH值

牛血清的pH理論值為7.0～8.0，培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的試劑后（即達到細胞生長所需要的滲透壓），再加入10％的牛血清，一般會使培養(yǎng)液的pH值發(fā)生改變。因此在使用過程中應注意pH的變化，如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調pH到所需值。

2、由于血清的營養(yǎng)成分豐富，非常適合細菌、真菌和支原體等生長。國產(chǎn)血清大部分采用手工分裝，因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒有及時發(fā)現(xiàn)，將會把污染物帶入正在培養(yǎng)的細胞中，而使得細胞不能正常生長。

3、血清在貯存解凍過程中會產(chǎn)生沉淀，這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質，在-15℃冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀，隨著保存時間的延長，沉淀量會增加。因此在融化血清時一般應先在4℃放置使之解凍，然后放在室溫使血清*融化，以避免沉淀的增加。添加血清時應避免把沉淀加入培養(yǎng)液，否則由于沉淀的存在會使得所培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量黑點，或者細胞表面將會覆蓋一層油狀物質，影響細胞的正常生長。為減少血清的損失，可以把有沉淀的血清收集起來進行離心處理，將上清液加入培養(yǎng)液使用（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）。

（二）大規(guī)模細胞培養(yǎng)中牛血清對細胞及病毒滴度的影響

血清是一種成分復雜的混合物，不同批次血清對細胞生長的促進作用不同。大規(guī)模細胞培養(yǎng)中由血清引起的細胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾個方面：

1、細胞生長速度緩慢，長滿單層時間長；從同一細胞瓶中分出兩瓶細胞，用同一種培養(yǎng)液，分別加入10％的對照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時，會出現(xiàn)對照血清長滿單層，而待檢血清大約只有60～70％，這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細胞。

2、細胞傳代后形態(tài)不正常，細胞狀態(tài)發(fā)生變化 ；由于血清的質量問題，使原本狀態(tài)正常的細胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差；比如：細胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點（并非污染），或者細胞表面形成一層油狀覆蓋物；細胞的輪廓變得模糊，細胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充，從而影響細胞向四周擴展生長。

3、細胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象，不能連續(xù)傳代 ；質量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子，會使細胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細胞會從正常的貼壁狀態(tài)，邊緣開始上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細胞表面不光滑，晃動細胞瓶會看到細胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動。隨著傳代次數(shù)增加，細胞上翹的情況越來越嚴重，直到終*脫壁而死亡。

4、細胞長的很好，致密的單層，狀態(tài)也很正常，但是接毒后細胞基本不發(fā)生病變，做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因為血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體，牛腹瀉病毒抗體等，如果存在這些抗體，就會把接進去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高，病毒會被抗體*中和，就沒有毒顆粒在細胞中增殖，所以會檢測不到病毒滴度。這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當大的，不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費，浪費人力、物力，尤其是時間上的浪費，從培養(yǎng)細胞開始到接病毒，到收液至少需要一兩個月，一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況，那么這一兩月時間就白白浪費掉了，這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風險之一。

5、細胞生長的狀態(tài)一般，產(chǎn)毒少，毒價低。這種情況比較常見，細胞是病毒的載體，由于血清質量不好，導致細胞生長狀態(tài)不好，病毒就無法進行正常的復制。并非所有毒都不能復制，所以就造成疫苗的效價不夠，可能造成不合格產(chǎn)品。

看來一款血清直接關系細胞的生死存亡，不用擔心，上海素冉提供無支原體，低內毒素和低血紅素的，無反復凍融的高品質血清。