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超博供應(yīng)qPCR.熒光定量

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超博供應(yīng)qPCR.熒光定量

qPCR熒光定量是指在反應(yīng)體系中加入熒光基因,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

  qPCR熒光定量技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,qPCR熒光定量具有特異性更強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、速度快、全封閉反應(yīng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),已成為*的核酸分子定量的標(biāo)準(zhǔn)方法,目前在基因表達(dá)研究和臨床疾病檢測(cè)等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用(如轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物檢測(cè)、RNAi基因失活率檢測(cè)、病原微生物或病毒含量檢測(cè)、基因差異表達(dá)、基因分型)。

超博供應(yīng)qPCR.熒光定量

 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)指的是在PCR進(jìn)行的同時(shí),對(duì)其過程進(jìn)行監(jiān)測(cè)的能力(即實(shí)時(shí))。因此,數(shù)據(jù)可在PCR擴(kuò)增過程中,而非PCR結(jié)束之后,進(jìn)行收集。這為基于PCR的DNA和RNA定量方法帶來了革命性的變革。在實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)中,反應(yīng)以循環(huán)中*檢測(cè)到目標(biāo)擴(kuò)增的時(shí)間點(diǎn)為特征,而非在一定循環(huán)數(shù)后目標(biāo)分子累計(jì)的擴(kuò)增量。目標(biāo)核酸的起始拷貝數(shù)越高,則會(huì)越快觀察到熒光的顯著增加。相反,終點(diǎn)法檢測(cè)(也稱“讀板檢測(cè)”)測(cè)量的是PCR循環(huán)結(jié)束時(shí)累計(jì)的PCR產(chǎn)物量

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