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人肝癌細胞

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應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)

人肝癌細胞購買細胞注意事項:

1. 收到細胞后*先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。NCI-H226人肺鱗癌細胞此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于技術(shù)部溝通交流。"    P4

    包裝規(guī)格:    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)

    細胞規(guī)格:    1*10(5)/ml——1*10(6)/ml

    安全水平:    1

    細胞種屬:    人

    組織來源:    肺

    細胞形態(tài):    上皮細胞樣

    細胞特性:    貼壁

    細胞融合度:    95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

    細胞檢測:    細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

    "細胞培養(yǎng)三不要:

養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:

1. 不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)

其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈。

2. 不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎毎鲜情L不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。

3. 不要怕消化。NCI-H226人肺鱗癌細胞在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大,對細胞的傷害也是很大的。"    詳見細胞說明書

    傳代方法:    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件:    詳見細胞說明書

    主要文獻:    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用*廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。
MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。*初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞。
Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)。
RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
干粉培養(yǎng)基:以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調(diào)pH值,過濾,過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的**會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會減少,因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的,批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多,以前是這樣,但現(xiàn)在大家都認同了。 
無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清,但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細胞因子。NCI-H226人肺鱗癌細胞無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是**的,從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。?C7132    OACP4C細胞株    ,公司提供背景資料、生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息,我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗,能提供細胞培養(yǎng)全fang位的技術(shù)支持,讓您實驗再無煩擾!人肝癌細胞

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