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人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
1. 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?
要冷藏??!因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。
2.人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,-24?C保存。
3. 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 培養(yǎng)用液pH對細(xì)胞生長的影響
由于,大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。
但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。
4.人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 細(xì)胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎?
不見得!因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng)。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進(jìn)行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為:
?。?)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
?。?)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA這種消化液。
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
上一產(chǎn)品:HCCC9810人肝癌細(xì)胞
下一產(chǎn)品:KBM-7人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞
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