人成骨肉瘤細(xì)胞

詳細(xì)說(shuō)明

細(xì)胞名稱 Saos-2(Saos2)；人成骨肉瘤細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性 上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格 1×10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件 McCoy’s 5A+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)條件 氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

背景資料 該細(xì)胞是Fogh J和Trempe G分離和鑒定的眾多人類腫瘤細(xì)胞系中的一種；該細(xì)胞來(lái)自一位11歲的白人女性的骨肉瘤組織。患者經(jīng)過(guò)放療以及氨甲喋呤、阿霉素、長(zhǎng)春新堿、環(huán)磷酰胺和 aramycin-C等多種藥物治療。該細(xì)胞在免疫抑制小鼠中不致瘤，細(xì)胞表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子EGF受體、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（1型和2型）受體。

人成骨肉瘤細(xì)胞

常規(guī)說(shuō)明：

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液

細(xì)胞質(zhì)檢情況：不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請(qǐng)務(wù)必重視。

一、 Saos-2(Saos2)；人成骨肉瘤細(xì)胞復(fù)蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來(lái)，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動(dòng)。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來(lái)噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。

2. 把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來(lái)），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來(lái)。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動(dòng)，使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。

4. 標(biāo)好細(xì)胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。

5. 3天換一次培養(yǎng)基。

二、 Saos-2(Saos2)；人成骨肉瘤細(xì)胞傳代

1. 培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。

2. 把原有培養(yǎng)基吸掉。

3. 加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細(xì)胞就行），消化1-2分鐘。

4. 細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5. 用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。

6. 把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。

8. 根據(jù)細(xì)胞種類把細(xì)胞傳到幾個(gè)培養(yǎng)皿中。一般，癌細(xì)胞分5個(gè)，正常細(xì)胞傳3個(gè)。繼續(xù)培養(yǎng)。