HT-29(HT29)；人結(jié)腸癌細(xì)胞詳細(xì)說明

細(xì)胞名稱 HT-29(HT29)；人結(jié)腸癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性 上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格 1×10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件 McCoy’s 5A+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)條件 氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

背景資料 該細(xì)胞是1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來，已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含血清的McCoy’s 5A培養(yǎng)基培養(yǎng)。 該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤，也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細(xì)胞可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素；表達(dá)尿激酶受體，但沒有檢測(cè)到血漿酶原活性；不表達(dá)CD4，但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺（HIV的可能替代受體）。該細(xì)胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性；p53基因過表達(dá)，并且在273位密碼子處發(fā)

HT-29(HT29)；人結(jié)腸癌細(xì)胞常規(guī)說明：

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液

細(xì)胞質(zhì)檢情況：不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請(qǐng)務(wù)必重視。

一、 HT-29(HT29)；人結(jié)腸癌細(xì)胞復(fù)蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動(dòng)。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。

2. 把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動(dòng)，使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。

4. 標(biāo)好細(xì)胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。

5. 3天換一次培養(yǎng)基。