外泌體提取試劑盒（細(xì)胞上清）

VEX Exosome Isolation Reagent (from cell culture media)

細(xì)胞培養(yǎng)液上清外泌體提取試劑

操作簡(jiǎn)單快捷：無需超高速離心機(jī)，一步沉淀

兼容低量樣本：細(xì)胞培養(yǎng)上清可低至1 ml

產(chǎn)量穩(wěn)定可靠：較低的離心力沉淀，獲得的外泌體結(jié)構(gòu)更完整，較傳統(tǒng)提取方法具有更高產(chǎn)量

HeLa細(xì)胞傳代培養(yǎng)48 h后，取細(xì)胞培養(yǎng)液上清，分別使用R公司、L公司、S公司以及VEX^® Exosome Isolation Reagent (from cell culture media) (Vazyme #R601) 進(jìn)行外泌體的提取，后進(jìn)行NTA分析和Western Blot分析，并用所得外泌體進(jìn)行RNA提取及miRNA-qPCR檢測(cè)。

結(jié)果可見：VEX^® Exosome Isolation Reagent (from cell culture media) (Vazyme #R601) 提取得到的顆粒直徑峰，峰形更窄，分布更好（圖A），產(chǎn)量更高（圖B）。與同類產(chǎn)品L 處理后的樣本檢測(cè)結(jié)果高度一致，且效率略高于L公司（圖C）。Western Blot 顯示均能檢測(cè)到外泌體標(biāo)志性蛋白CD63（圖D）。

VEX^® Exosome Isolation Reagent (from cell culture media) 是專門用于分離提取細(xì)胞培養(yǎng)液上清樣本中外泌體的試劑，通過簡(jiǎn)單的較低速度離心即可從樣本中分離出大量外泌體。本產(chǎn)品與傳統(tǒng)的超高速離心相比，樣本中的外泌體所受到的壓力較小，可以保持較完整的形態(tài)；同時(shí)提取過程所需要的時(shí)間更短、所需要的樣本起始量更低、提取效率更高。使用本產(chǎn)品獲得的外泌體可適應(yīng)于多種下游應(yīng)用，如RNA分析、高通量測(cè)序、細(xì)胞共培養(yǎng)等。

4℃保存。

外泌體提取試劑盒（細(xì)胞上清）

Q1：適用的樣本有什么要求？

A1：本品適用于各種類型細(xì)胞培養(yǎng)液上清中外泌體的提取。為防止FBS中存在較多的外泌體造成污染，可在細(xì)胞培養(yǎng)至50%-70%左右更換無血清培養(yǎng)基或者不含外泌體的血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)約12 h后收集上清使用。也可直接使用不含外泌體的血清培養(yǎng)基直接培養(yǎng)細(xì)胞，后續(xù)直接收集細(xì)胞培養(yǎng)液上清進(jìn)行外泌體提取。

Q2：一次實(shí)驗(yàn)需要多少體積培養(yǎng)液？

A2：細(xì)胞培養(yǎng)液上清中外泌體的量受細(xì)胞類型、狀態(tài)、數(shù)目的影響各不相同，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求決定樣本起始量。

Q3：提取的Exosome如何應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn)？

A3：離心后的沉淀可用100 μl-200 μl的1×PBS重懸后使用，也可使用下一步實(shí)驗(yàn)的試劑直接處理沉淀。例如，可直接使用裂解液吹打重懸沉淀后進(jìn)入RNA提取流程。

Q4：誤將該試劑放在-20℃保存了，還能繼續(xù)使用嗎？

A4：該試劑應(yīng)該放在4℃保存，如果誤放在了-20℃保存，試劑的性能會(huì)有所下降，不建議繼續(xù)使用。