經(jīng)過優(yōu)化FITC-12-dUTP 與未標(biāo)記dNTP 的比例，提高了熒光檢測的信噪比和靈敏度

高活性的重組TdT 酶保證熒光摻入效率

適用于細(xì)胞爬片、石蠟切片和冰凍切片

細(xì)胞凋亡的一個顯著特點(diǎn)是細(xì)胞染色體的DNA 被內(nèi)源核酸內(nèi)切酶有規(guī)律的降解成長度約為180 bp-200 bp 的整倍數(shù)的片段。本試劑盒采用TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 法，應(yīng)用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase，TdT) 在凋亡細(xì)胞斷裂的DNA的3’- 羥基(3’-OH) 末端催化摻入熒光素-12-脫氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP 標(biāo)記的DNA 可以用熒光顯微鏡直接觀察或者用流式細(xì)胞儀定量。試劑盒對標(biāo)記反應(yīng)進(jìn)行了優(yōu)化，采用佳比例的FITC-12-dUTP 和未標(biāo)記dNTP 進(jìn)行3’-OH 末端的核苷酸摻入，使得同一個斷裂的DNA 片段末端可以形成更長的“標(biāo)記尾巴”。該“標(biāo)記尾巴”減少了相鄰摻入dNTP 上標(biāo)記基團(tuán)的空間位阻，增加每個斷裂片段上的熒光基團(tuán)數(shù)目，降低熒光基團(tuán)相鄰后可能造成的聚集和淬滅，從而提高檢測靈敏度，減少非特異性反應(yīng)。

經(jīng)過優(yōu)化FITC-12-dUTP 與未標(biāo)記dNTP 的比例，提高了熒光檢測的信噪比和靈敏度，高活性的重組TdT 酶保證熒光摻入效率，適用于細(xì)胞爬片、石蠟切片和冰凍切片。